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“小体积”却有“大容量”,我们是不一样的磁珠纯化!

作者:admin 信息来源:达科为 日期:20190614 打印 字体:  
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Strep-tag®蛋白纯化系统是基于生物素(Biotin)和链霉亲和素(Streptavidin)之间的相互作用开发出来的亲和层析蛋白纯化体系。

IBA Lifescience经过不断的优化,目前已经研发出两套成熟的Strep-tag®蛋白纯化体系:

  • 二代Strep-tag® II & Strep-Tactin®

  • 具有更高亲和力的三代Twin-Strep-tag® &Strep-Tactin®XT

*想了解详细系统介绍,请点击查看:

IBA蛋白纯化技术革新:第三代Strep-tag®系统

MagStrep “type3” XT beads

IBAStrep-tag®蛋白纯化产品,除了预装柱、ÄKTA™仪器预装柱、填料等,还有专门针对小规模、高通量纯化Strep-tag®融合蛋白的磁珠产品。

MagStrep “type3” XTbeads是由Strep-Tactin®XT涂布的磁珠,不仅可以纯化含Strep-tag®的蛋白,还可以用于Pull-downRNA Co-IP实验(文末附有参考文献)。

技术优势

  •  高结合载量:~0.85 nmol/µl beads,相当于可结合25.5 µg 30kDa的蛋白;

  •  低背景非特异性的结合少;

  • 灵活的洗脱方式loading buffer存在的条件下煮沸洗脱,或者使用Biotin将目标蛋白从磁珠上洗脱;

  • Strep-tag® IITwin-Strep-tag®的亲和力极高归功于磁珠上的Strep-Tactin®XT。

实验参数

图1. 使用MagStrep “type3” XT beads从原始细菌提取物中纯化GFP-Strep-tag融合蛋白。

使用Agilent Bioanalyzer 2100 System分析提取出来的蛋白,发现不管是直接以Buffer BXT (含Biotin)将靶蛋白洗脱下來,或是加入sample buffer煮沸来分离目标蛋白,都能得到高纯度的蛋白。

适用范围

  • 样本体积不超过2.5 ml;

  • 建议目的蛋白浓度>10 μg/ml;

  • 磁珠大小为25 µm,可做批量处理;

  • 不能重复使用。

综合以上特点,使用MagStrep “type3” XTbeads可得到极佳的纯化效果。对于需要高纯度蛋白的您,此磁珠是最适用于小规模、快速蛋白质纯化的工具。

相关产品

产品

规格

货号

磁珠

MagStrep  "type3" XT beads 5% suspension

2 ml

2-4090-002

相容磁座

Magnetic  Separator

for 24 reaction  tubes

2-1602-000

洗脱溶液

10x Buffer BXT;  Strep-Tactin®XT Elution Buffer

25 ml

2-1042-025

洗涤溶液

10x Buffer W;  Strep-Tactin®/Strep-Tactin®XT Wash Buffer

100 ml

2-1003-100

参考文献

  • Protein purification

Essuman K, Summers DW, Sasaki Y, Mao X, Yim AKY, DiAntonio A, MilbrandtJ. (2018) TIR Domain Proteins Are an AncientFamily of NAD+ -Consuming Enzymes. Curr Biol. 28(3): 421-430.

Zhang Y, Ptacin JL, Fischer EC, Aerni HR, CaffaroCE, San Jose K, Feldman AW, Turner CR, Romesberg FE. (2017)A semi-synthetic organism that stores and retrieves increased genetic information. Nature. 551(7682): 644-647. 

  • Pull-down assay

González M, Brito N, González C. (2017)The Botrytis cinerea elicitor protein BcIEB1 interacts with the tobaccoPR5-family protein osmotin and protects the fungus against its antifungalactivity. New Phytol. 215(1): 397-410. 

Jeong, S. J., Park, S., Nguyen, L. T., Hwang, J., Lee, E. Y., Giong, H.K., ... & Kim, H. K. (2019).A threonyl-tRNA synthetase-mediated translation initiation machinery. NatureCommunications10(1), 1357.

Maidorn, M., Olichon, A., Rizzoli, S. O., & Opazo, F. (2019). Nanobodies reveal an extra-synaptic population of SNAP-25and Syntaxin 1A in hippocampal neurons. In MAbs (Vol. 11,No. 2, pp. 305-321). Taylor & Francis. 

  • RNA co-immunoprecipitation 

Chen Z, Mashburn-Warren L, Merritt J, Federle MJ, Kreth J. (2017) Interference of a speB 5' untranslated region partialdeletion with mRNA degradation in Streptococcus pyogenes. Mol OralMicrobiol.32(5): 390-403.


IBA Lifesciences(德国):IBA公司总部位于德国。二十年来,IBA以杰出的专利技术Strep-tag®系统为基础,发展出完整的产品组合,涵盖重组蛋白表达丶纯化与固定以及从全血或相关体液中分离特定细胞的技术。同时,IBA也是全球领先的核酸合成专家,在DNARNA寡核苷酸的合成上已有超过二十年的经验,能根据客户的选择,生产含有特定染料或化学修饰的特殊寡核苷酸。



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