五分钟完成粘末端连接？Fast-Link™ DNA Ligation Kit，您值得拥有！
酶是生物体非常重要的一类蛋白质，之前小达君给大家安利了Lucigen的RNase R（RNase R——RNase家族的“外貌协会成员”）和CircLigase™ II ssDNA Ligase（“单链DNA环化连接酶——CircLigase™ II ssDNA Ligase”），今天继续给大家介绍一款特色的DNA连接酶，完整的DNA连接试剂盒可以让您在5min内完成DNA重组，一起来了解下吧~
Fast-Link™ DNA Ligation Kit
Fast-Link™ DNA Ligation Kit使用了高质量的连接酶 (Fast-Link T4 DNA Ligase), 可提供快速高效的DNA连接，粘末端的连接可在室温5分钟内完成。另外，在转化感受态细胞前，与其他连接酶相比，Fast-Link™ DNA Ligation Kit的连接产物不需要脱盐，操作更简便。
应用
★ PCR产物的平末端和TA克隆
★ 测序接头与平末端的连接
★ 基因组DNA的克隆和亚克隆
★ BAC/fosmid文库构建
★cDNA克隆
★ 接头连接
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Type of End |
Ligation Time |
% White Colonies |
Recombinants per µg DNA |
|
Overhang |
5 min. |
93 |
2.0 x 106 |
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Blunt |
15 min. |
71 |
4.4 x 105 |
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PCR product with 3´-A overhang |
1 hr. |
68 |
1.2 x 104 |
表1 Fast-Link™连接不同产物的测试数据
实验结果
图1. 使用Fast-Link™ Kit粘末端连接的过程
按标准连接反应使用2U Fast-Link™ ligase进行Lambda Hind III markers连接(泳道2-6). 泳道M, 1-kb ladder;泳道1,无酶对照;泳道2-6, 分别为5 min, 15 min, 30 min, 1 hr, 2 hr连接结果。
图2. 使用Fast-Link™ Kit平末端连接过程
pUC 19 DNA用Pvu II消化，然后按标准连接反应使用2U Fast-Link™ ligase进行连接(泳道1-6). 泳道 M,1-kb ladder;泳道1,无酶对照;泳道2-6, 分别为5 min, 15 min, 30 min, 45min, 1 hr连接结果。
产品优势
★ 室温五分钟完成粘末端连接 (图1)
★ 室温15分钟完成平末端连接 (图2)
★在16℃下连接PCR产物(A端突出)，在1小时内完成，高连接效率（表1）
★在转入大肠菌感受态细胞前，快速连接反应不需要脱盐处理
★ 进行BAC连接，插入> 100 kb可在4小时内进行，而不像其它的连接酶需要过夜反应
产品内容物
Fast-Link DNA Ligase (2 U/μL)
Fast-Link™ 10X Ligation Buffer
ATP (10 mM)
说明书链接（请点击阅读原文）：https://www.lucigen.com/docs/manuals/MA086E-Fast-Link-Kits.pdf
产品信息
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分类 |
货号 |
产品名称 |
规格 |
网站报价 |
品牌 |
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依赖ATP的DNA连接酶 |
LK0750H |
FAST-LINK™ DNA LIGATION KIT |
50 rxns |
￥1,937 |
Lucigen |
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LK6201H |
FAST-LINK™ DNA LIGATION KIT |
100 rxns |
￥3,172 |
Lucigen |
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依赖NAD+的DNA连接酶 |
A0102K |
Ampligase® DNA Ligase with Buffer |
2,500 U @ 100 U/μl |
￥3,406 |
Lucigen |
|
A0110K |
Ampligase® DNA Ligase without Buffer |
10,000 U @ 100 U/μl |
￥8,827 |
Lucigen |
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A1905B |
Ampligase® 10X Reaction Buffer |
5 ml |
￥858 |
Lucigen |
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A3202K |
Ampligase® DNA Ligase with Buffer |
2,500 U @ 5 U/μl |
￥3,601 |
Lucigen |
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A3210K |
Ampligase® DNA Ligase without Buffer |
10,000 U @ 5 U/μl |
￥9,009 |
Lucigen |
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A32750 |
Ampligase® DNA Ligase with Buffer |
750 U @ 5 U/μl |
￥1,651 |
Lucigen |
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A8101 |
Ampligase® DNA Ligase Kit |
1,000 U @ 5 U/μl |
￥2,327 |
Lucigen |
品牌介绍
美国Lucigen公司成立于1998年，提供各类用于分子生物学相关产品，可以使研究者成功克隆较难克隆的基因，其在2016年收购了Illumina旗下Epicentre产品线。目前产品类别主要包括：体外转录、基因克隆（BAC克隆试剂盒）、感受态细胞（TG1噬菌体文库构建感受态）、体外扩增、转座子突变、蛋白表达、文库构建等。
