ELISA检测样本的处理

在收集标本前需有一个完整的计划，需要清楚要检测的成份是否足够稳定。ELISA检测提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。

◇ 液体类标本：

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

◇ 血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

◇ 细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇ 组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。