高质量的细胞分离液-Polymorphprep

细胞分离可以通过物理或者免疫磁珠的方法去除不感兴趣的细胞，有助于目的细胞的富集并去除死细胞。密度梯度离心法是最常用的方法富集感兴趣的细胞，原理是根据细胞在介质中的沉降系数进行分离，特定密度的细胞可以在密度梯度介质中被轻松分离。Serumwerk Bernburg是专门的生产商和服务商，为广大科研和临床工作者提供一系列碘化物的密度梯度分离液包括：即用型、多功能型分离液，产品符合GMP标准，具有安全无毒、低渗透性和分离纯化效果好等特点。

多形核粒细胞(PMNs)，主要是中性粒细胞，同时包括少量嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。Polymorphprep分离液的高渗透压可使红细胞失水而缩小，从而增大红细胞的有效浮力密度，同时分离液中的葡蔗糖能促使红细胞聚集并在溶液中快速沉降，随着离心过程红细胞会被逐渐沉降到底部，所以利用Polymorphprep分离液可以快速有效的同时获得PMNs和PBMC细胞。

具体的实验流程如下：

1、为了达到最好的效果，使用抗凝全血，如EDTA，肝素或柠檬酸。EDTA 抗凝效果最佳。

2、将5毫升血液+ 5毫升分离液放入15毫升试管中，下层是分离液上层是血液。

3、500-550g室温离心30分钟，离心速度缓升缓降，升2档降2档。

4、离心后，可以看到两圈白膜层。上面PBMCs，下层是PMNs，小心吸取PMN。

5、为使PMNs恢复正常渗透压，可以加入等体积的0.45% NaCl溶液或0.5体积正常浓度的培养基进行稀释。

6 、将细胞悬浮液转移到一个15ml的试管中，加入2ml PBS, 400 g离心10分钟(18-22°C)，也可以被重悬在培养基中完成后续实验。

注意事项：

1）该分离液仅适用于人的未作稀释的血液，不适用于动物血液。

2）建议使用两小时内的新鲜血液，待分离血液和待用分离液的温度需要保持在18度-22度之间。

3）注意离心时间越长或离心力越大，会导致PMN进一步向红细胞处迁移。

4）这里使用15ml离心管，推荐用5 ml血液+ 5 ml分离液进行密度梯度离心，若使用50ml离心管，建议使用 18 ml 血液+18 ml Polymorphprep™。

Serumwerk Bernburg成立于1954年，是一家现代化的生产商和服务商。2021年6月1日起，Serumwerk Bernburg AG公司从雅培诊断收购了密度梯度分离液产品线。并授权达科为是中国独家代理商。分离液系列产品不仅可以分离多种种属，如人、灵长类、啮齿类、兔、反刍动物等来源的多种细胞、亚细胞器，还可以分离纯化膜囊泡、病毒、蛋白质，核酸等物质。分离液产品生产、包装、发布严格按照GMP和ISO13485标准执行。

公司网址：https://diagnostic.serumwerk.com/

达科为可以提供Serumwerk Bernburg AG的全系列分离液产品，产品信息如下图所示：