《流式新产品》|全光谱流式细胞仪新荧光Spark Blue™550和Spark NIR™685，助力探索流式大世界！

流式细胞术在日常实验中经常被用到，以流式细胞仪为工具，通过多种荧光标记的抗体以及荧光染料对细胞进行多参数分析，其强大的信息收集和处理能力，可以为研究人员呈现丰富而全面的细胞信息。

目前，流式细胞分析仪已经从只能同时检测几个参数发展到可以同时检测几十个参数，比如最新的全光谱流式细胞仪系统已经可实现同时40色的多色分析。为了满足大家的需求，BioLegend公司也发布了用于全光谱流式细胞仪的新荧光，包括SparkBlue™550和Spark NIR™685。下面我们就一起来学习一下这两种新荧光吧！

一、SparkBlue™550

Spark Blue™550被488nm蓝色激光激发并在550nm处发射，介于AlexaFluor^®488或FITC和PE的峰值发射之间。SparkBlue™550的亮度与FITC相当。405nm紫外激光可以进一步增加这几种荧光不互相混合的情况。

（一）Spark Blue™550可与FITC和PE抗体区别开

使用抗CD19-Spark Blue™550与CD4-BV570™、CD38-PE以及CD40-FITC等不同组合抗体对人全血进行染色。图中数据均来至于淋巴细胞门。结果可以看出SparkBlue™550可以完全与FITC和PE荧光区别开，该数据使用Cytek™Aurora流式仪检测。

（二）Spark Blue™550染色的一致性和有效性

用抗CD4和抗CD19的不同荧光抗体组合对人全血染色，结果显示Spark Blue™550染色具有有效性以及和其他常见荧光PE、AF647相比染色后相应群体比例也具有一致性。

二、Spark NIR™ 685

由于近红外（NIR）范围内的荧光发射光谱以及光电倍增管（PMT）对800nm以上发射波长的不敏感性，633nm红色激光器仅限于2-3个荧光。借助全光谱流式细胞仪，APC和AlexaFluor®700的发射峰之间的光谱间隙可检测Spark NIR™685等新型荧光。Spark NIR™685可被633 nm激发，最大发射波长为685 nm，与FITC具有相似的亮度。

（一）使用Spark NIR™685荧光来扩展配色方案

来自相同供体的全血用图A或B配色方案染色。图A包括抗人CD4-FITC、CD19-Alexa Fluor700、CD8-PacificBlue ^TM、CD3-PE以及CD56-PE-Cy7的抗体。图B包括抗人CD4-Spark NIR ^TM685、CD19-AlexaFluor 700、CD8-APC-Fire^TM 750、CD3-PE以及CD56-APC的抗体。

三、以3激光的Aurora全光谱流式细胞仪为例，以下是其荧光通道

四、在我们的帮助下完善多色配色方案

随着流式细胞术多色配色中参数的数量不断增加，多色配色变得越来越困难。如果您需要帮助，请与我们的技术支持团队联系，发送邮件至tech_immumo@dakewe.net。

*备注：Brilliant Violet™是Sirigen Group 的商标。AlexaFluor^®和Pacific Blue™是Thermo Fisher Scientific及其子公司的注册商标。Cytek™是Cytek Biosciences的商标。Spark Blue™和Spark NIR™是BioLegend的商标。