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细胞/基因治疗:AAV滴度检测试剂盒和分离液

作者:admin信息来源:达科为日期:2019年03月20日打印字体:  
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腺相关病毒(AAV)是欧盟FDA最早认证的基因治疗载体。AAV的几大特点是其在临床和研究中广泛应用的基础:安全、宿主范围广、低免疫原性、长期稳定表达外源基因、良好的扩散性能和物理性质稳定等。而且,越来越多的临床试验证明了AAV载体的有效性和良好的安全性,使之成为基因治疗研究的热点,并被认为是介导基因治疗的理想载体之一。

One-stepgeneration of modular CAR-T cells with AAVCpf1

作者利用腺相关病毒( AAV )CRISPR -Cpf1系统,开发了一种高效的制备的Car-T的方法,而且具有显著增强的特征。该技术使得Car-T制备的高效性大大提高。

目前发现的AAVAAV1~AAV11DJ12种不同的血清型,主要区别在于衣壳蛋白Cap的不同,并决定不同血清型AAV对不同的组织和细胞有不同的感染效率。

12种不同血清型AAV对个组织器官细胞的亲和性


Progen可提供最常用的AAV血清型的ELISA滴度检测试剂盒。该ELISA试剂盒的捕获抗体经过独特设计,只识别野生型、重组型或者组装的空AAV质粒,而不会试别未组装的质粒蛋白,因此结果准确,可重复性高ATCCprogenAAV滴度检测试剂盒写入了他们的methodology哦。


达科为还提供AXIS-SHIELD OptiPrep™分离液,particle number ratios 比CsCl梯度分离的至少高100倍,是病毒分离的理想选择,为AAV分离提供更好的工具。

CAT# AS1114542


AAV滴度检测试剂盒以及检测抗体(Progen可提供用于IHCWBELISA的抗体)相关文献:

1 Grimm D, Kern A,Pawlita F, Ferrari F, Samulski R and Kleinschmidt J. Titration of AAV-2particles via a novel capsid ELISA: packaging of genomes can limit productionof recombinant AAV-2. Gene Therapy 6:132-1330 (1999).

2 Kuck, D., Kern,A. & Kleinschmidt, J. A. Development of AAV serotype-specific ELISAs usingnovel monoclonal antibodies. J. Virol. Methods 140, 17–24 (2007).

3 Sonntag, F. etal. The Assembly-Activating Protein Promotes Capsid Assembly of DifferentAdeno-Associated Virus Serotypes. J. Virol. 85, 12686–12697 (2011).

4 Lock M, McGorrayS, et al. Characterization of a recombinant Adeno-Associated Virus Type 2reference standard material; Hum Gene Therapy 21:1273-1285 (2010).

5 Gurda, B. L. etal. Mapping a neutralizing epitope onto the capsid of adeno-associated virusserotype 8. J. Virol. 86, 7739–7751 (2012).

6 Mietzsch,M. et al. OneBac: platform for scalable and high-titer production ofadeno-associated virus serotype 1-12 vectors for gene therapy. Hum. Gene Ther.25, 212–22 (2014)

7 Ayuso, E. etal. Manufacturing and characterization of a recombinant adeno-associated virustype 8 reference standard material. Hum. Gene Ther. 25, 977–987 (2014).

8 D’Costa, S. etal. Practical utilization of recombinant AAV vector reference standards: focuson vector genomes titration by free ITR qPCR. Mol. Ther. Methods Clin. Dev. 5,16019 (2016).



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