定位你的能量小体MitoSpy™ Mitochondrial Probes

        MitoSpy™ Orange和 MitoSpy™ Red定位于线粒体是基于膜电位，因此MitoSpy™ Orange和 MitoSpy™ Red能很好的反应细胞的健康状态和定位。MitoSpy™Orange CMTMRos和MitoSpy™Red CMXRos含有一个氯甲基团，它能共价与细胞中的半胱氨酸连接，这使得细胞在经过固定破膜后，仍能保持在细胞中。但由于固定破膜过程中洗掉了大部分的试剂，所以这需要使用更高的试剂浓度来获得充分的染色（具体浓度可参考下表）。

        而MitoSpy™ Green FM不同于之前的两个，它定位于线粒体不是基于膜电位。它不含有氯甲基，而是含有氟甲基，所以固定破膜之后，大部分的MitoSpy™ Green会被洗掉。所以需要固定破膜的样本，不建议使用该试剂。

          NIH3T3 cells were stained with 100 nM of MitoSpy™ Red CMXRos (red) for 20 minutes at 37°C, fixed with 1% paraformaldehyde (PFA) for ten minutes at room temperature, and permeabilized with 1X True Nuclear™ Perm Buffer for ten minutes at room temperature. Then the cells were stained with Flash Phalloidin™ NIR 647 (green) for 20 minutes at room temperature and counterstained with DAPI (blue). The image was captured with a 60x objective

Live staining (50 nM)            Fix/Perm staining(500nM)

MitoSpy™ Orange

MitoSpy™ Green

        而对于MitoSpy™ Green，但现在MitoSpy™ Green FM的完整机制还不是很清楚，可能与该试剂的结构和线粒体表面的蛋白之间的同源性相关。由于该试剂的膜电位的独立性，可以用于流式中测量单个细胞的线粒体量。